ENTEROtest 24


Princip metody:

Pro průkaz biochemické aktivity bakterií byla vyvinuta celá řada různých biochemických identifikačních testů, kterými detekujeme přítomnost produktů či metabolitů vznikajících utilizací sacharidů, bílkovin či dalších látek nebo přímo vybrané enzymy, specifické pro daný druh bakterií. Diagnostika pozitivní biochemické reakce je založena na změně barvy testovacího média, ke které dochází změnou příslušného indikátoru. V dnešní době se nejčastěji využívají standardní komerční testy, a to ve formě diagnostických proužků (stripů) pro jednotlivé reakce (např. OXItest, VPtest, ONPtest) nebo diagnostických souprav určených pro diagnostiku zvolené skupiny bakterií (ENTEROtest, EN-COCCUStest, STAPHYtest, atd.).

Diagnostická souprava ENTEROtest 24 je určena pro definitivní identifikaci bakterií z čeledi Enterobacteriaceae a Vibrionaceae do 24 hodin. Souprava obsahuje 24 biochemických testů umístěných na třech řádcích (trojstripu) dělené mikrotitrační destičky.



Pracovní postup:

Čistou 24-hodinovou kulturu testovaného kmene důkladně homogenizujeme v 3 – 4 ml sterilního fyziologického roztoku ve zkumavce tak, aby vzniklý zákal odpovídal 1. stupni McFarlandovy zákalové stupnice. Destičku vyjmeme z transportní vaničky a pomocí skalpelu odřízneme příslušný počet řad destičky, odpovídající počtu testovaných kmenů (1 kmen = 3 řady, tj. trojstrip). Vyříznuté řady vyjmeme z destičky, umístíme do prázdného rámečku, uvolníme ochrannou hliníkovou fólii a překryjeme víčkem. Do všech jamek příslušného trojstripu inokulujeme 0,1 ml připravené bakteriální suspenze. K jamkám H, G, F, E, D a C prvého řádku (testy IND, H2S, LYS, ORN, URE, ARG) přikápneme po 2 kapkách sterilního parafinového oleje. Rámeček překryjeme hliníkovou fólií a víčkem, vložíme do PE sáčku a inkubujeme v termostatu při teplotě 37 °C po dobu 24 hodin.


Hodnocení:

Nejprve na destičce zakapeme činidly následující jamky:

Destičku necháme inkubovat 30 minut při teplotě 37 °C pro vývoj barevných reakcí. Po uplynutí této doby zakapeme činidlem jamku:

Pomocí barevné srovnávací stupnice pro ENTEROtest 24 odečteme výsledky ostatních testů, výsledky zaznamenáme do přiloženého formuláře. Stanovíme číselný kód (profil) testovaného kmene a pomocí Diagnostického seznamu provedeme vlastní identifikaci zkoušeného mikroorganismu.


Film ENTEROtest 24