Molekulární biologie

Kontrolní otázky - co musím znát

Molekulární biologie

1. Co je předmětem studia vědní disciplíny Molekulární biologie?
2. Jaké metody využívá Molekulární biologie?
3. K jakému účelu lze využít metody molekulární biologie?

Využití metod molekulární biologie

1. Co patří k metodám molekulární biologie?
2. V jakých oborech (oblastech) lze využít metody molekulární biologie?
3. K jakému účelu se využívají metody molekulární biologie v oblasti základního výzkumu?
4. K jakému účelu se využívají metody molekulární biologie v oblasti aplikovaného genetického výzkumu?
5. K jakému účelu se využívají metody molekulární biologie v potravinářském a farmaceutickém průmyslu?
6. K jakému konkrétnímu účelu byly metody molekulární biologie použity na cvičeních?
7. Jaké konkrétní metody molekulární biologie byly použity na cvičeních?

Izolace DNA

1. Z jakého materiálu lze izolovat DNA?
2. Jaký je princip izolace DNA?
3. Jakým postupem byla izolována DNA na cvičeních?

PCR

1. Jaký je princip PCR?
2. Kdo je autorem této metody?
3. Co znamená zkratka PCR?
4. Co je to amplifikace?
5. V jakém přístroji probíhá PCR?
6. Co vše se dává do reakce?
7. Co je to primer?
8. Jaký enzym je použit v PCR a z čeho byl izolován?
9. Jaká je funkce DNA polymerázy v PCR?
10. Kolik cyklů má obvykle PCR?
11. Jaké jsou fáze jednoho cyklu PCR?
12. Čím je zajištěna denaturace DNA?
13. K čemu dojde při denaturaci DNA?
14. Při jaké teplotě probíhá denaturace DNA?
15. K čemu dochází při annealingu?
16. Při jaké teplotě probíhá annealing?
17. K čemu dochází při extension?
18. Při jaké teplotě probíhá extension?
19. Kolik molekul DNA získáte např. po 5 cyklech PCR, když v reakci byla na začátku 1 molekula DNA?
20. Kolik molekul DNA získáte po 30 cyklech PCR, když v reakci byla na začátku 1 molekula DNA?
21. K čemu lze využít metodu PCR?
22. Jak se přesvědčíte, že se Vám podařilo namnožit DNA?

Gelová elektroforéza

1. Jaký je princip gelové elektroforézy?
2. K čemu se používá gelová elektroforéza?
3. Jaké úseky DNA se budou v gelu pohybovat rychleji, ty kratší nebo delší a proč?
4. Jak se připraví gel?
5. Proč se do gelu přidává ethidium bromid nebo Sybr Green?
6. Proč se ke vzorku přidává vkládací pufr?
7. Co je to velikostní marker (lader) a k čemu slouží?
8. Jak se vytvoří na gelu jamky do kterých se pak nanáší vzorky?
9. Jak se zviditelní výsledek gelové elektroforézy?
10. K čemu byla tato metoda použita na cvičeních?

RFLP

1. Co znamená zkratka RFLP?
2. Jaký je princip RFLP?
3. K čemu slouží RFLP?
4. Jak na gelu rozlišíte samčí a samičí pohlaví ptáků?

Southern blotting, hybridizace

1. K čemu slouží Souhern blotting?
2. Jaký je princip Southern blottingu?
3. Jaký přístroj se používá pro Southern blotting?
4. Co je to hybridizace?
5. Co je to sonda, jak se připraví a k čemu slouží?
6. Jak mohou být označeny sondy použité při hybridizaci?

Sekvenování

1. Co znamená sekvenování DNA?
2. Jaký je princip sekvenování DNA?
3. Jaké jsou dvě metody sekvenování DNA?
4. Jak se liší dideoxynukleosidtrifosfát (ddNTP) od deoxynukleosidtrifosfátu (dNTP)?
5. Jak probíhá enzymová metoda sekvenování?
6. Jaký je hlavní rozdíl mezi klasickou PCR a modifikovanou „asymetrickou“ PCR používanou v sekvenování?
7. Jak probíhá automatické sekvenování?
8. Jak se nazývá přístroj pro automatické sekvenování?
9. Jak probíhá detekce pořadí nukleotidů při kapilární elektroforéze?
10. K čemu se využívá sekvenování?

Genomika, proteomika

1. Čím se zabývá obor Genomika?
2. Čím se zabývá komparativní genomika?
3. Čím se zabývá obor Proteomika?
4. Kdy byl osekvenován lidský genom?

Tyto výukové materiály byly spolufinancovány Evropským sociálním fondem a státním rozpočtem ČR.