Průvodce praktickou výukou
z biologie a genetiky

Metody výzkumu v biologii - Buněčné a tkáňové kultury

Úkol 1: Pozorování buněk v buněčné kultuře

TP: ledvinné buňky králíka z buněčné kultury

Pozorujte a zakreslete si ledvinné buňky králíka z buněčné kultury.

Obr.: Buňky rozdílné morfologie z buněčné kultury v klidové fázi a v mitóze.

Úkol 2: Práce s inverzním mikroskopem a buněčnou kulturou

NP: adherentní buňky z buněčné kultury.

V inverzním mikroskopu si prohlédněte kultivační láhev s buněčnou kulturou. Všímejte si tvaru buněk pokrývajících celé dno láhve. Poté slijte médium z láhve, propláchněte roztokem PBS (phosphate buffered saline, fosfátem pufrovaný fyziologický roztok) a do láhve přidejte 2 ml trypsinu. Po určité době dojde účinkem trypsinu k uvolnění buněk ze dna láhve, což se projeví zakalením obsahu láhve. Uvolňování buněk je možné urychlit mírným nahříváním nad kahanem nebo mechanicky klepáním láhví o dlaň ruky. Pod inverzním mikroskopem pozorujte uvolněné buňky, které jsou zakulacené a volně plavou. Do kultivační láhve přidejte médium obsahující sérum, které inhibuje účinek trypsinu, tak aby se zabránilo natrávení buněk. Poté slijte obsah láhve do kádinky, připravte si nativní preparát a pozorujte pod svým mikroskopem. Zakreslete si tvar buněk a porovnejte s tvarem, který měly buňky přisedlé.