Prokaryota a pozorování pod imerzí
Úkol 1: Příprava trvalého preparátu suchou cestou – otiskový preparát jazyka
Čisté podložní sklíčko vyžíhejte v plameni. Na vychladlé sklíčko obtiskněte do středu skla jazyk, který si předtím trochu zdrsněte zuby. Pozorujte preparát pod suchými objektivy a zakreslete epiteliální buňku jazyka (je potřeba stáhnout clonu). Poté preparát fixujte nad plamenem (stačí 3x protáhnout nad plamenem roztěrem nahoru) a obarvěte barvením Giemsa-Romanowski po dobu 10 min. Po opláchnutí barviva vodou osušte filtračním papírem a nechte dosušit na vzduchu. Zastavte preparát nejdříve pod suchými objektivy, prohlédněte si epiteliální buňku jazyka (eukaryotická buňka) a změřte její velikost. Následně použijte imerzní objektiv (postup viz výše) k zastavení bakterií (prokaryotická buňka) a změřte jejich velikost pro porovnání s epiteliální buňkou jazyka.
Obr.: Epitelliální buňky jazyka a bakterie.
Úkol 2: Příprava trvalého preparátu suchou cestou – roztěr bakterií
Nejdříve si vyžíhejte bakteriologickou kličku v plameni a poté proveďte kličkou stěr z povrchu agarové půdy porostlé koloniemi bakterií (zástupci Gram pozitivních a Gramnegativních bakterií). Obsah kličky homogenizujte v co nejmenší kapce vody na podložním sklíčku, po usušení na vzduchu fixujte nad plamenem (stačí 3x protáhnout nad plamenem roztěrem nahoru) a proveďte barvení preparátu.
Postup barvení dle Grama:
- na sklíčko s roztěrem bakterií kápněte barvivo krystalová violeť (nechat barvit 3 min)
- slijte, opláchněte destilovanou vodou a převrstvěte preparát Lugolovým roztokem (KI + I + H2O) (2 min)
- slijte, opláchněte destilovanou vodou a přidávejte etanol tak dlouho dokud se bude barvivo vyplavovat
- opláchněte destilovanou vodou a převrstvěte karbolfuchsinem (1,5 min)
- opláchněte destilovanou vodou a osušte
Preparát s obarvenými bakteriemi pozorujte pod imerzním objektivem. Do protokolu si zaznamenejte, jak se oba typy bakterií navzájem liší tvarem buněk a zbarvením.
Obr.: Postup zhotovení roztěru bakterií: A – přenos bakterií do kapky vody bakteriologickou kličkou, B – homogenizace, C – hotový roztěr bakterií.
Úkol 3: Sinice
NP: vzorek vláknitých sinic drkalek (Oscillatoria sp.)
Pozorujte a zakreslete si buňky sinic. Hned po zhotovení preparátu je možné pozorovat kývavý (drkavý) pohyb, který dal těmto sinicím jméno a který je způsobený nerovnoměrným bobtnáním slizového obalu. Velikost a tvar sinic můžete porovnat s prvoky, buňkami zelených řas nebo rozsivek, které se v preparátu mohou rovněž vyskytovat.
Obr.: Porovnání sinic s buňkami zelené řasy a rozsivky.
Obsah
- Biologie
- Chemické složení
- Nebuněčné živé soustavy
- Prokaryota, imerze
- Eukarya
- Pohyb a dráždivost
- Transport látek, osmóza
- Mitóza
- Rozmnožování a vývoj
- Vlivy vnějšího prostředí
- Metody výzkumu v biologii
- Genetika
- Cytogenetika
- Modelový organismus
- Monohybridismus
- Polyhybridismus
- Polymorfní geny
- Genové interakce
- Dědičnost a pohlaví
- Vazba genů
- Populační genetika
- Kvantitativní genetika
- Nemendelistická dědičnost