Průkaz:
Touto metodou je stanoven počet tzv.
presumptivních Bacillus cereus, tedy předpokládaných příslušníků tohoto druhu. Použitými konfirmačními testy totiž nelze odlišit
B. cereus od blízce příbuzných, ale řidčeji se vyskytujících druhů rodu
Bacillus –
B. anthracis,
B. thuringiensis,
B. weihenstephaniensis a
B. mycoides.
Princip:
Určený objem tekutého vzorku, výchozí suspenze u ostatních výrobků a jejich desetinásobných ředění se roztírá na agarovou živnou půdou v Petriho miskách. Jako arbitrážní půda je určen
Mannitol Yolk Polymyxine B agar (MYP agar). Naočkované plotny se inkubují aerobně při 30 °C po dobu 24-48 hodin. Následně se provede konfirmace vybraných charakteristických kolonií a úprava počtu kolonií na miskách podle výsledku konfirmace.
Morfologie charakteristických kolonií:
- MYP agar – po 24 hodinách kultivace roste B. cereus ve velkých suchých drsných koloniích s nepravidelnými okraji, růžové barvy (negativní manitol), obklopených růžovou zónou precipitace.
- KA – po 24 hodinách kultivace roste B. cereus ve velkých suchých drsných koloniích s nepravidelnými okraji, šedé barvy, obklopených různě širokou zónou ß-hemolýzy. Dále je popisován typický zápach po myšině.
Konfirmace:
Kolonie vybrané ke
konfirmaci rozočkujeme na povrch krevního agaru, po aerobní inkubaci při 30 °C po dobu 24 hodin hodnotíme hemolytickou reakci.