Metoda průkazu Escherichia coli O157
Průkaz Escherichia coli O157 vyžaduje 4 po sobě jdoucí stupně:
pomnožení zkušebního vzorku, který se homogenizuje v modifikovaném bujónu s enzymaticky natrávenými kaseinem a sójou a s přídavkem novobiocinu (mTSB + N), inkubace probíhá aerobně při 41,5 °C po dobu 18-24 hodin;
koncentraci a separaci zjištovaných bakterií pomocí imunomagnetických částic, na jejichž povrch byla nanesena protilátka vůči antigenu E. coli O157;
vyočkování imunomagnetických částic s adherovanými bakteriemi subkultivací jednak na MacConkeyove agaru s cefiximem, teluricitanem draselným a sorbitolem (CT-SMAC), a dále na druhé selektivní půdě (napr. SMAC s BCIG, chromogenní agar, atd.). Vyočkování imunomagnetických částic se provádí sterilní bakteriologickou klickou, naočkované plotny se obvykle inkubují aerobně při 37 °C po dobu 18-24 hodin;
konfirmaci sorbitol-negativních kolonií z půdy CT-SMAC (průhledné, bezbarvé až světle žlutohnědé kolonie o průmeru asi 1 mm) a typických kolonií z druhé kultivacní půdy, a to na základě tvorby indolu a aglutinace s antisérem vůči antigenu E. coli O157 a je-li k dispozici i s antisérem pro bicíkový antigen H7. Na základe výsledku konfirmace potvrdíme nebo vyloučíme přítomnost Escherichia coli O157 v 25 g nebo 25 ml vyšetrovaného vzorku.