Metoda průkazu bakterií rodu Staphylococcus aureus

Průkaz:

Pro stanovení S. aureus se používají živná média obsahující selektivní složky inhibující růst doprovodných mikroorganismů, např. 5,5-10 % NaCl, azid sodný, teluričitan draselný, chlorid lithný či některá antibiotika – polymyxin, neomycin, atd. Diagnostickou složkou je většinou vaječný žloutek, příp. fibrinogen a králičí plazma. Pro stanovení počtu se běžně používají plotnové metody. U vzorků s očekávaným nízkým počtem S. aureus lze použít metodu MPN. Pro stanovení stafylokokových enterotoxinů ve vzorcích potravin lze použít imunologické metody např. RPLA nebo ELISA (viz. I. díl skript).

Princip:

Určený objem tekutého vzorku, výchozí suspenze u ostatních výrobků a jejich desetinásobných ředění se roztírá na agarovou živnou půdou v Petriho miskách. Jako arbitrážní půda je určen Baird-Parker agar (B-P agar) s vaječnou emulzí a teluričitanem draselným. Naočkované plotny se inkubují aerobně při 37 °C po dobu 24-48 hodin. Následně se provede konfirmace vybraných typických a atypických kolonií (koagulázový test) a úprava počtu kolonií na miskách podle výsledku konfirmace.

Morfologie charakteristických kolonií:

typické kolonie mají kolonie rostou na médiu B-P agaru v koloniích černé nebo černošedé barvy, jsou lesklé a vypouklé, o průměru 1-1,5 mm, obklopené zónou projasnění, v zóně projasnění se může objevit opalescentní prstenec.

Konfirmace:

Konfirmace vybraných kolonií spočívá v provedení koagulázového testu.