Průkaz:
Pro stanovení proteolytických mikroorganismů se používají
elektivní půdy, na kterých rostou i jiné druhy mikroorganismů, ale netvoří typické kolonie. Pro stanovení proteolytických mikroorganismů se používají půdy s přídavkem bílkovin (např. odstředěné mléko, želatina).
Princip:
Proteolytické mikroorganismy produkují enzymy, které rozkládají bílkoviny přidané do živného média a vytvářejí okolo kolonií zónu projasnění. Určený objem tekutého vzorku, výchozí suspenze u ostatních výrobků a jejich desetinásobných ředění se roztírá na agarovou živnou půdou v Petriho miskách, např.
agar s odstředěným mlékem (MO agar). Naočkované plotny se inkubují aerobně při 30 °C po dobu 72 hodin. Stanoví se počet mikroorganismů v 1 ml nebo 1 g vzorku z počtu kolonií vyrostlých na vybraných miskách.
Alternativní metoda: Pro stanovení proteolytických mikroorganismů lze použít také agar s želatinou. Po ukončení inkubace převrstvíme agar 5-10 ml kyselého roztoku chloridu rtuťnatého. Během jedné minuty se kolem kolonií proteolytických mikroorganismů objeví zóna želatinolýzy zatímco ostatní médium zbělá vytvořeným precipitátem.
Morfologie charakteristických kolonií:
Po ukončení inkubace spočítáme na každé misce kolonie, kolem kterých se vytvořila
zóna projasnění. Pro výpočet použijeme misky obsahující ne více než 150 kolonií ve dvou po sobě jdoucích ředěních. Je nutné, aby jedna z těchto misek obsahovala alespoň 15 kolonií. Počet proteolytických mikroorganismů vyjádříme jako počet KTJ v 1 ml nebo 1 g vzorku.
;){kind=link}