Molekulární BIOLOGIE I.
Úvodní informace k cvičením z molekulární biologie – materiál k vyšetření.
Cvičení z molekulární biologie jsou sestavena tak, aby se studenti prakticky seznámili s metodami, které se využívají k analýze DNA.
Studenti si sami vyzkouší izolaci DNA, amplifikaci DNA pomocí PCR, restrikční reakci s PCR produktem, elektroforézu,
vizualizaci DNA a hodnocení výsledku. Tyto metody budou využity při řešení jednoho komplexního úkolu.
Bude se jednat o určení pohlaví ptačího jedince z biologického materiálu pomocí restrikční analýzy PCR produktu specifického genu.
Každý student bude pracovat samostatně. Materiál k vyšetření bude zajištěn, ale lze si zajistit svůj vlastní materiál.
Instrukce k zajištění vlastního materiálu:
K vyšetření lze použít jakékoliv ptačí buňky obsahující DNA. Lze odebrat krev od ptačího jedince zaživa, krev nebo orgány během porážky (kur, husa, kachna....), případně odebrat tkáň z drůbežího masa koupeného v tržní síti.Ptačí krev:
- odběr do zkumavky s anti-koagulans EDTA (zkumavky budou k vyzvednutí u laborantky paní Janové)
- požadovaný objem je minimálně 200 μl
- po odběru je třeba vzorek uložit do mrazáku při teplotě pod –15 °C
Ptačí tkáň (svalovina či vnitřní orgán):
- odběr do igelitového sáčku nebo zkumavky
- o velikosti minimálně dvou špendlíkových hlaviček
- po odběru je třeba vzorek uložit do mrazáku při teplotě pod –15 °C
Vzorek je třeba označit (jméno studenta, číslo skupiny) a předat paní Janové k evidenci a uložení do mrazáku ve cvičebně.
Vzorky je potřeba přinést nejpozději do 7. cvičení, kdy bude probíhat příprava tkáně k izolaci DNA.
